绿色木霉外源基因表达系统的构建

利用PCR方法克隆瑞氏木霉(Trichoderma reesei)外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅰ基因(cbhⅠ)启动子序列,以pSK载体为骨架,构建了pSK-cbh Ⅰ-GFP-hph表达载体,并成功转入到绿色木霉(T.viride)Sn-9106中.通过对绿色木霉Sn-9106进行遗传改造,为纤维素酶基因在木霉中同源重组表达提供遗传转化平台.     

木霉菌处理对青椒果实贮藏性状的影响

以青椒品种安椒18为材料,研究了(10±1)℃条件下,600倍木霉菌、多菌灵处理对青椒果实贮藏性状(呼吸强度、叶绿素、维生素C和腐烂率)的影响。结果表明,稀释600倍的木霉菌液处理显著抑制了贮藏过程中青椒果实的呼吸强度,延缓了叶绿素和维生素C的分解,降低了果实的腐烂率。600倍的木霉菌稀释液处理对青椒保鲜效果较好。     

生物炭基肥与哈茨木霉菌剂配施对烤烟和植烟土壤质量的影响

以云烟87为研究对象,研究了施生物炭基肥、哈茨木霉菌剂和二者配施对烟草发病率、根际土壤速效养分、土壤酶活性及烤后烟品质的影响。结果表明,生物炭基肥降低了烟草普通花叶病（TMV）的发病率,较常规施肥降低5.37个百分点;生物炭基肥与哈茨木霉菌剂配施可提高烟株对黑胫病（BS）和青枯病（BW）的抗性,相对防治效果分别达64.19%和64.97%;生物炭基肥处理可增加土壤有机质、速效钾、速效磷、碱解氮含量和蔗糖酶、脲酶的活性,分别较常规处理最大增加21.90%、98.09%、52.77%、60.71%、90.69%和80.78%;生物炭基肥与哈茨木霉菌剂配施增加了烟叶总糖和还原糖含量,中部叶较常规施肥增加2.52和3.46个百分点,上部叶较常规施肥增加了2.46和3.01个百分点;中部叶和上部叶的钾氯比较常规施肥分别增加16.51%和19.24%;生物炭基肥与哈茨木霉菌剂配施能够提高烟叶多酚和中性致香物质含量,中部叶较常规施肥处理提升13.81%和11.29%,上部叶较常规施肥处理提升12.04%和8.60%。生物炭基肥和哈茨木霉菌剂配施对防治烟草病害、改善土壤养分和提升烟叶质量的效果最佳。     

Systemic resistance induced in Arabidopsis thaliana by Trichoderma asperellum SKT-1, a microbial pesticide of seedborne diseases of rice

BACKGROUND: Trichoderma asperellum SKT-1 is a microbial pesticide of seedborne diseases of rice. To investigate the mechanisms of disease suppression in SKT-1, the ability to induce systemic resistance by SKT-1, or its cell-free culture filtrate (CF), was tested using Arabidopsis thaliana Col-0 plants. RESULTS: Both SKT-1 and its CF elicit an induced systemic resistance against the bacterial leaf speck pathogen Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 in Col-0 plants. Involvement of plant hormones in the induced resistance by SKT-1 and CF was assessed using Arabidopsis genotypes such as the jasmonic acid (JA)-resistant mutant jar1, the ethylene (ET)-resistant mutant etr1, the plant impaired in salicylic acid (SA) signalling transgenic NahG and the mutant npr1 impaired in NPR1 activity. In soil experiments using SKT-1, no significant disease suppression effect was observed in NahG transgenic plants or npr1 mutant plants. Expression levels of SA-inducible genes such as PR-1, PR-2 and PR-5 increased substantially in the leaves of Col-0 plants. Expression levels of JA/ET-induced genes such as PDF1.2a, PR-3, PR-4 and AtVsp1 were also induced, but the levels were not as high as for SA-inducible genes. In a hydroponic experiment using CF from SKT-1, all Arabidopsis genotypes showed an induced systemic resistance by CF and increased expression levels of JA/ET- and SA-inducible genes in leaves of CF-treated plants. CONCLUSION: The SA signalling pathway is important in inducing systemic resistance to colonisation by SKT-1, and both SA and JA/ET signalling pathways combine in the signalling of induced resistance by CF. These results indicate that the response of A. thaliana is different from that found in root treatments with barley grain inoculum and CF from SKT-1. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry     

降解多菌灵木霉菌株的分离及其生防与降解特性

从长期施用多菌灵的葡萄园土壤中分离纯化得到一株能够降解多菌灵的木霉(Trichoderma sp.)菌株Tr1.在以多菌灵为惟一碳源的无机盐培养基中培养14 d后,该菌株对多菌灵的降解率为45.74％.在无机盐培养基中添加少量氨源,可以提高木霉Tr1对多菌灵的降解率,尤其是添加0.1％酵母粉,降解率达到了66.57％.木霉Tr1在含氮的无机盐培养基上的最适生长温度为28℃,最适初始pH为6.5.木霉Tr1还对所测定的6种植物病原真菌(Rhizoctonia solani,Phytophthora capsici,Verticillium dahliae Kleb,Phoma uvicola Berk,Bipolaris sorokiniana( Sacc.)hoemaker,Fusarium moniliforrne Sheld)都具有抑菌活性.该项研究为木霉在植物病害生物防治及多菌灵污染土壤修复方面的应用提供了基础.     

绿色木霉F6降解玉米秸秆的固体发酵条件优化

[目的]探寻绿色木霉(Trichoderma viride)F6固体发酵降解玉米秸秆的最佳发酵条件。[方法]研究发酵温度、基质含水率、通气状况、接种量及基质初始pH对玉米秸秆降解率的影响,在此基础上采用二次正交旋转组合设计对这5个因素及其交互作用对玉米秸秆降解率的影响进行分析,并对其发酵条件进行了优化。[结果]玉米秸秆固体发酵的最适条件为31.6℃下调节基质含水率61.7%,pH6.0,接种5.0 ml液体菌种,6层纱布封口。经验证,该条件下玉米秸秆的降解率可达46.38%。[结论]绿色木霉F6固体发酵降解玉米秸秆效果良好,操作简单,经济高效,有较高的应用价值。     

里氏木霉RutC-30产纤维素酶条件优化研究

[目的]优化里氏木霉RutC-30产纤维素酶的液体发酵条件。[方法]以里氏木霉RutC-30为出发菌株,通过单因素试验研究培养基不同氮源(硫酸铵、尿素、蛋白胨)及浓度、不同碳源(纤维素、乳糖、甘油、葡萄糖)及浓度和不同的初始pH(3.0、4.0、5.0、6.0、7.0)对产酶的影响,在此基础上选取氮源、碳源和pH为影响因子采用正交试验探讨里氏木霉RutC-30产纤维素酶的优化条件。[结果]正交试验分析表明,各因素对产酶影响顺序依次为碳源>氮源>pH,里氏木霉RutC-30产纤维素酶的最佳条件是:以1%纤维素为碳源、以0.5%蛋白胨为氮源,初始pH值为4.0,在30℃产酶发酵培养5 d,纤维素酶活力高达7.303 U。[结论]里氏木霉RutC-30经优化培养后,产酶能力可得到大幅度提高,具有潜在的工业应用价值。     

木霉菌与内生细菌防治甜瓜枯萎病的协同增效作用研究

[目的]探讨木霉菌与内生细菌防治甜瓜枯萎病的协同增效作用。[方法]在离体和活体条件下,研究了木霉菌T23和Ta22分别与内生细菌B6和B20-006复合使用对甜瓜枯萎病的防治效果。[结果]内生细菌B6和B20-006不论是与木霉菌T23复合处理还是与Ta22复合处理的防治效果均高于4个生防菌单独处理,其中B6+T23和B20-006+Ta22 2个复合处理的相对防效分别高达82.2%和81.0%。[结论]应用内生细菌与木霉菌复合防治甜瓜枯萎病有明显的协同作用。     

木霉菌TC对辣椒疫病的防治效果

通过对峙培养等方法分离筛选出对辣椒疫霉菌有效拮抗的木霉菌株,进行了辣椒疫病的盆栽防病试验。结果表明:木霉(Trichoderma spp.)TC株系对辣椒疫霉(Phytophthoracapsic)引起的辣椒疫病有良好的防治效果。对峙培养和木霉菌挥发性代谢物质抑菌活性测定试验中对辣椒疫霉菌都有非常好的抑制作用,抑制率分别可达到75%和70%。盆栽试验结果表明,先浇灌接种孢子悬浮液后60d接种辣椒疫霉,对疫病的防治效果可达73.7%。将木霉TC与15%甲霜灵1 000倍协同作用防治辣椒疫病时,可达82.5%,防效比单独使用木霉或甲霜灵要好。二者表现出较好的协同防治作用。     

引进木霉菌株T43对立枯病的抑制效果及对苗木的促生作用

把从以色列引进、室内抑菌试验显示对苗木立枯病菌(立枯丝核菌Rhizoctonia solani、腐霉Pythium sp.和腐皮镰刀菌Fusarium oxysporum)具有显著抑制效果的绿木霉Trichoderma virens菌株T43制成不同浓度菌剂,对落叶松Larix sp.和红松Pinus koraiensis 1年生苗木进行室外灌根处理,30 d后测定苗木生长及病害发生情况。结果表明:引进的绿木霉T43菌剂在显著控制落叶松和红松立枯病发生的同时,还显著提高苗木的生长、土壤微生物种群数量及土壤酶活性,该菌株液体菌剂适合落叶松苗木,孢子悬浮液适合红松苗木。